1. 現象描述 氨基柱進酸性樣品后,出現: 柱效降低(表現為峰變寬、塔板數下降、分離度下降) 有時柱壓也略有升高 色譜峰更不對稱,甚至基線漂移 2. 原因分析 (1)固定相氨基官能團易被酸損傷/析出 氨基柱的固定相是氨丙基(-NH?(CH?)?-)鍵合在硅膠表面。 這類官能團本身就是作為極性作用點,被強酸性流動相或樣品進柱沖洗后,易被酸水解、斷裂或部分溶解,導致固定相流失。 譬如在酸性條件下:Si-O-Si(CH?)?NH? + H? → Si-OH + Si(CH?)?NH?? 等反應 結果:固定相極性功能性減少/丟失,分離能力變差,柱效必然下降。 (2)酸與氨基基團反應導致化學活性喪失 氨基為堿性,遇酸易質子化為NH??,極性和化學活性狀態改變,分離機制被擾亂。 反復多次后,鍵合層恒久性化學破壞,柱效徹底損傷。 (3)硅膠基體本身在強酸(或極酸性環境)下容易溶解 pH < 2時,硅膠骨架可能逐步溶蝕; 氨基柱對pH更為敏感(比C18等烷基柱還“脆弱”)。 3. 實際應用提示 氨基柱建議在pH 3-8 或更窄范圍使用,不宜遇強酸(流動相或進樣酸性過強都不合適)。 進酸性(如含強酸、低pH有機酸等)樣品,建議先中和后進樣,或直接選用更耐酸類型色譜柱(如C18或特殊耐酸柱)。 柱效降低不可逆,嚴重時柱子需更換。 |
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